DOG1

- DOG1 = Discovered On GIST1

- Patrón de tinción: predominantemente membranoso, también citoplasma.

- Tinción en tejido normal:

         * La más intensa se observa en: las células intersticiales de Cajal, memb apical epitelio vesícula seminal, células serosas glánd salivares. 

         *Tinción débil o moderada: células mucinosas gl.salival, céls epiteliales de estómago, vesícula, células caliciformes intestinales, trompa, c. mioepiteliales mama

         *Con el anticuerpo monoclonal SP31 hay reactividad cruzada y tinción intensa en los espermatocitos (puede ser de utilidad en biopsias de testículo por infertilidad).

- Utilidad principal: diagnóstico de GIST. Es el marcador más específico de GIST y se expresa en el 65-100 % de los casos. Tiene además mayor sensibilidad que c-kit: tiñe 1/3 de los GISts c-kit negativos. También se utiliza para el diagnóstico del carcinoma de células acinares de gl. salival (no totalmente específico).

- Otros tumores con positividad frecuente (>30% de los casos) para DOG1:  adenomas de células basales de gl.salival,  adenocarcinoma ductal páncreas, carcinoma escamoso esófago, adenocarcinoma esófago, ampulomas, carcinomas escamosos de cavidad oral y de vulva, adenomas y adenocarcinomas colorrectales, carcinomas endometrioides de endomterio.

- Por tanto el valor de DOG1 como marcador diagnóstico de GIST es mayor en tumores fusocelulares que en los epitelioides (como hemos visto hay muchos carcinomas positivos para DOG1), aunque hay que recordar que los leiomiosarcomas también pueden presentar con cierta frecuencia positividad (27%).

- El valor pronóstico de la sobreexpresión de DOG1 es controvertido.

Referencias:

Miettinen 2009. AJSP

Jansen 2021. Pathol Res Pract.

Salama 2019. Ann Diag Pathol

Rekhtman 2020. Quick Refererence Handbook

ARID1A

- Tinción normal: Positividad nuclear.

- Tinción patológica: núcleos negativos: la ausencia de expresión sugiere mutación del gen.

- En numerosas neoplasias puede haber pérdida de ARID1A (mutación de ARID1A). Las diferencias en la frecuencia de estas mutaciones puede ayudar al diagnóstico (por ejemplo, carcinoma seroso de endometrio vs carcinoma endometrioide de alto grado; carcinoma de células claras de ovario vs carcinoma no células claras; etc).

BRAF

- Nos referimos al anticuerpo VE1 para la mutación V600E en BRAF:

- El gen BRAF se localiza en el brazo largo del cromosoma 7. Las mutaciones en BRAF se observan en diferentes neoplasias, y de ellas, la más frecuente es la V600E. La mutación V600E consiste en la sustitución de valina por ácido glutámico en el resíduo 600. 

- La mutación V600E se observa en un 55% de melanomas (diana terapéutica), 40-50% de carcinomas papilares de tiroides (diana terapéutica y utilidad para diagnóstico diferencial benignidad-malignidad), 30% de cáncer de ovario, 5% de carcinomas colorrectales sin inestabilidad de microsatélites, algunos carcinomas colorrectales con pérdida de expresión IHQ de MLH1 (en los que sugiere que esta última ocurre por metilación de su promotor y no por mutación en línea germinal de MLH1:es decir, la mutación en BRAF excluiría un síndrome de Lynch), 3% de carcinoma pulmonar no microcítico (diana terapéutica), leucemia de células peludas.

- La proteína resultante de la mutación V600E es detectable mediante IHQ con el anticuerpo monoclonal VE1. Por ello la positividad IHQ puede servir como screening para indicar estudio molecular (que se requiere, para confirmar la mutación).

- Por tanto: en una célula normal la tinción debe ser negativa; en una célula con mutación V600E será positiva.

- Patrón de tinción: citoplasmática.

Referencias:

Rekhtman 2019.

Dvorak 2019. Pathol Oncol Res

Seto 2019. Pathol Internat

Rashid 2020. J Clin Lab Anal

Fumarato hidratasa

- La fumarato hidratasa o fumarasa es un enzima del ciclo de Krebs.

- Patrón de tinción IHQ: citoplasmático.

- Patrón normal: positividad  La expresión se pierde en neoplasias “deficientes” en fumarato hidratasa:

- Carcinoma de células renales deficiente en FH: muy raro esporádico; generalmente en el contexto de un síndrome HLRCC (carcinoma de células renales y leiomiomatosis hereditarios), autosómico dominante, por mutación en la línea germinal.Histología peculiar.

- Leiomiomas uterinos deficientes en FH: igualmente, por mutación somática o germinal (síndrome HLRCC). Histología peculiar.

- Leiomiomas cutáneos (si son múltiples y ampliamente distribuidos suelen ser la principal manifestación del síndrome HLRCC). Histología convencional.

- Además de la pérdida de FH, todos estos tumores son positivos para el marcador 2-SC, útil para el diagnóstico.

- Si se diagnostica alguna de estas lesiones recomendad estudio en línea germinal para descartar mutación de FH / síndrome HLRCC.

-Se han  descrito algunos casos de otros tumores con ocasional disminución de FH como algunos paragangliomas, t, de c, de Leydig,etc

H3K27m

- Detecta proteína resultante de mutaciones en la posición 27 de la histona H3. 

              **OJO: es anticuerpo diferente al H3K27me3.

- Utilidad: diagnóstico de los gliomas de la línea media.

IDH1

- Patrón de tinción: citoplasma.

 - Este anticuerpo es específico para la proteína resultante de la mutación en el codón 132 de IDH1, que es la mutación más frecuente): la proteína IDH1R132H ; se utiliza para detectar los gliomas mutados para IDH (detecta el 90% de las mutaciones).

                 * En el 10% de mutaciones restantes, la tinción IHQ es negativa y se requiere estudio molecular para detectarlas. (Si realmente no hay mutaciones de IDH, es decir los gliomas “wild- type” son similares clínica y molecularmente a glioblastomas, aunque tengan histología de bajo grado).

Referencia: 

Rekhtman 2019

         

NTRK

- NTRK = Neurotrophic tropomyosin receptor kinase

- Biomarcador. La IHQ sirve como screening pero tendrá que confirmarse con técnicas de biología molecular (FISH o NGS).

- Existen 3 genes NTRK (1, 2 y 3), que codifican 3 proteínas Trk. Estas se expresan normalmente en sistema nervioso central y periférico y capa de músculo liso de los vasos.

- Las fusiones con los genes NTRK ocurren en algunas neoplasias, sobre todo con NTRK1 y NTRK2: son muy frecuentes en algunos tumores muy raros y muy infrecuentes en la mayoría de las neoplasias:

- La IHQ detecta el aumento anormal de la proteína TRK resultante de dicha fusión. Ventajas: rapidez, disponibilidad y precio. El anticuerpo utilizado detecta la región C-terminal de las 3 proteínas TRK, por lo que se detecta tanto las proteínas normales como las resultantes de la fusión, por ello este anticuerpo se denomina pan-TRK.

- Patrón de tinción: Variable y depende de la fusión concreta . Puede ser: nuclear, citoplasmático granular, citoplasmático difuso, de membrana, patrones combinados.

- Controles: la proteína normal ("wild type"), como hemos señalado antes, está expresada en sistema nervioso central y periférico (por ejemplo, corteza cerebelosa siendo la sustancia blanca casi negativa o débil, nervios periféricos, células ganglionares) y más débil en a muscular de los vasos.

- Umbral de tinción para determinar positividad: varía en la literatura entre 1 y 10%.

- Problema: la especificidad (50-80% según autores). Tumores sin fusión de Trk, con diferenciación neural o muscular, tumores neuroectodérmicos / gliales, varios sarcomas y otros, que tienen tinción intensa de la Trk normal (wild type).

Referencias:

- Weiss, Hum Pathol 2021.

- Penault-Llorca. J Clin Pathol 2019