H3K27m

- Detecta proteína resultante de mutaciones en la posición 27 de la histona H3. 

              **OJO: es anticuerpo diferente al H3K27me3.

- Utilidad: diagnóstico de los gliomas de la línea media.

IDH1

- Patrón de tinción: citoplasma.

 - Este anticuerpo es específico para la proteína resultante de la mutación en el codón 132 de IDH1, que es la mutación más frecuente): la proteína IDH1R132H ; se utiliza para detectar los gliomas mutados para IDH (detecta el 90% de las mutaciones).

                 * En el 10% de mutaciones restantes, la tinción IHQ es negativa y se requiere estudio molecular para detectarlas. (Si realmente no hay mutaciones de IDH, es decir los gliomas “wild- type” son similares clínica y molecularmente a glioblastomas, aunque tengan histología de bajo grado).

Referencia: 

Rekhtman 2019

         

NTRK

- NTRK = Neurotrophic tropomyosin receptor kinase

- Biomarcador. La IHQ sirve como screening pero tendrá que confirmarse con técnicas de biología molecular (FISH o NGS).

- Existen 3 genes NTRK (1, 2 y 3), que codifican 3 proteínas Trk. Estas se expresan normalmente en sistema nervioso central y periférico y capa de músculo liso de los vasos.

- Las fusiones con los genes NTRK ocurren en algunas neoplasias, sobre todo con NTRK1 y NTRK2: son muy frecuentes en algunos tumores muy raros y muy infrecuentes en la mayoría de las neoplasias:

- La IHQ detecta el aumento anormal de la proteína TRK resultante de dicha fusión. Ventajas: rapidez, disponibilidad y precio. El anticuerpo utilizado detecta la región C-terminal de las 3 proteínas TRK, por lo que se detecta tanto las proteínas normales como las resultantes de la fusión, por ello este anticuerpo se denomina pan-TRK.

- Patrón de tinción: Variable y depende de la fusión concreta . Puede ser: nuclear, citoplasmático granular, citoplasmático difuso, de membrana, patrones combinados.

- Controles: la proteína normal ("wild type"), como hemos señalado antes, está expresada en sistema nervioso central y periférico (por ejemplo, corteza cerebelosa siendo la sustancia blanca casi negativa o débil, nervios periféricos, células ganglionares) y más débil en a muscular de los vasos.

- Umbral de tinción para determinar positividad: varía en la literatura entre 1 y 10%.

- Problema: la especificidad (50-80% según autores). Tumores sin fusión de Trk, con diferenciación neural o muscular, tumores neuroectodérmicos / gliales, varios sarcomas y otros, que tienen tinción intensa de la Trk normal (wild type).

Referencias:

- Weiss, Hum Pathol 2021.

- Penault-Llorca. J Clin Pathol 2019

Citoqueratina 19

- Patrón de tinción: citoplasmática.

- Utilidades principales: diferenciar hepatocarcinoma (CK19-) de adenocarcinomas metastásicos en el hígado (CK19+); diferenciar seminoma (CK19-) de otros tumores germinales como carcinoma embrionario (CK19+); diagnóstico de las displasias del epitelio escamoso.

- Tejidos normales que expresan CK19: Fundamentalmente epitelios glandulares y capa basal de los epitelios escamosos no queratinizados (la epidermis es negativa), pero también muchas otras células.

- Tumores que SUELEN expresar CK19: Adenocarcinomas en general (páncreas, colorrectal, de esófago y estómago,...; carcinoma de mama; carcinomas seroso y endometrioide del ovario; carcinoma urotelial; carcinomas epidermoides.

- Tumores que SUELEN SER NEGATIVOS para CK19: Hepatocarcinomas, seminomas, tumores mesenquimales, tumores hematopoyéticos.

- También se utiliza para ayudar en lel diagnóstico diferencial entre adenoma folicular y la variante folicular del carcinoma papilar de tiroides aunque la especificidad es limitada: son CK19+ el 91-100% de los carcinomas y 44-68% de los adenomas. La rentabilidad diagnóstica aumenta si se combina con HBME1.

- Los cambios en la expresión de CK19 (aumento o disminución, según el tipo de tumor) pueden estar en relación con el grado de diferenciación y tienen impacto pronóstico en algunas neoplasias (mama, tiroides, riñón).

- Puede ser útil para el diagnóstico de displasias del epitelio escamoso: la sobreexpresión de CK19 puede ser un evento temprano en la transformación neoplásica de los epitelios escamosos, por lo que puede ayudar a reconocer la displasia.

Referencias:

Menz; Human Path 2021.

Erickson. Adv Anat Pathol 2008

DDIT3

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Utilidad principal: Diagnóstico del LIPOSARCOMA MIXOIDE, diferenciándolo de otros sarcomas.

- DDIT3 es un factor de transcripción nuclear implicado en la regulación de la génesis del tejido adiposo.

- En más del 95% de los liposarcomas mixoides existen fusiones con el gen DDIT3, no habiéndose identificado en otras neoplasias por lo que se consideran patognomónicas del liposarcoma mixoide y estos reordenamientos se pueden detectar con FISH. Esto puede ser necesario para llegar al diagnóstico, sobre todo ante tumores de alto grado o si tienen morfología de células redondas. Desde hace poco tiempo se dispone del anticuerpo que tenemos en nuestro panel y que puede servir para el mismo fin.

- Tiene valor, sobre todo, si la tinción es fuerte y difusa (98-100% de especificidad), puesto que tinciones débiles o focales se pueden observar en otros sarcomas, aunque con poca frecuencia. La sensibilidad es también alta (96%).

- En esta tabla tenéis los resultados en diferentes sarcomas:

- Referencia

Baranov; Mod Pathol 2021.

PRAME

* PRAME =  PReferentially expressed Antigen in MElanoma

* Patrón de tinción: NUCLEAR.

* Expresión en tejidos normales: testículo, ovario, placenta, suprarrenales, endometrio.

* UTILIDAD: Para el diagnóstico de malignidad en tumores melanocíticos:

    - PRAME es POSITIVO en la mayoría de los MELANOMAS (primarios o metastásicos) y NEGATIVO en la mayoría de los NEVUS. 

            - En los trabajos de Lezcano et al. fueron POSITIVOS el 88,5% de los melanomas no fusocelulares cutáneos invasivos, y NEGATIVOS el 86,9% de nevus melanocíticos. Fueron negativos el 100% de las inclusiones de células névicas en ganglios (útil para diagnóstico diferencial con melanomas metastásicos, los cuales fueron positivos). También fueron negativos los nevus azules cutáneos comunes estudiados, pero se ha comunicado un caso de nevus de Spitz en un niño positivo para PRAME.

            - OJO: Puede haber tinción débil en células hematolinfoides y en melanocitos no tumorales de piel con daño actínico.

            - OJO: la positividad no es específica de histogénesis: puede haber expresión de PRAME en neoplasias no melanocíticas como sarcomas y carcinomas de diferentes orígenes: En el trabajo de Jungbluth et al observaron las siguientes positividades:

Melanoma (metast.): 37/40 (93%);

Colorectal Ca: 0/10; RCCs (clear cell): 1/15 (15%); NSCLCs: 12/30 (40%);

Hepatocellular Ca: 1/10; Serous ovarian Ca.: 11/20 (55%); Invasive

ductal breast Ca.: 7/15 (45%); Synovial sarcoma: 10/10; Myxoid

liposarcoma: 5/5; Mesothelioma: 0/10.

                                         

Referencias:

- Lezcano, AJSP2018

- Jungbluth, Mod Pathol2018

- Lezcano, AJSP2020

H3K27me3

* H3K27me3 = Histona 3 trimetilada en la lisina en la posición 27.

* OJO: este anticuerpo detecta una alteración epigenética, con silenciamiento del gen. Es un anticuerpo diferente a H3K27M, que se usa para detectar mutaciones en dicho gen.

* Patrón de tinción: NUCLEAR. 

* Lo NORMAL es que sea positivo (valorar como control interno del tejido la tinción de células normales, por ejemplo células endoteliales y linfocitos). 

* Lo PATOLÓGICO es que se pierda la expresión, es decir la tinción NEGATIVA. 

* Utilidad: para el diagnóstico de TUMORES MALIGNOS DE LA VAINA NERVIOSA. 

            - En estos tumores suele haber mutaciones en EED/SUZ12 las cuales llevan a inactivación de PRC2. Esta alteración origina la pérdida de H3K27me3, es decir, la tinción IHQ es negativa. 

             - Sensibilidad variable en distintas series: 36 - 65,5%. 

            - La pérdida de tinción puede ser completa o parcial: el porcentaje de células negativas es variable. 

            - La pérdida de tinción es más frecuente en los tumores de mayor grado y cuando hay antecedentes de radiación. 

             - La pérdida completa de tinción es un factor de mal pronóstico en estos tumores vs. pérdida parcial de tinción o expresión intacta.

             - Aunque la pérdida es bastante específica de tumor malingo de la vaina nerviosa, también se puede observar en otros sarcomas asociados con radiación y en melanomas, no siendo tan útil para estos diagnósticos diferenciales.  

 

Referencias: 

Otsuka 2018. Pathol Res Pract. 

Anderson 2021. Diagnostics.