DOG1

- DOG1 = Discovered On GIST1

- Patrón de tinción: predominantemente membranoso, también citoplasma.

- Tinción en tejido normal:

         * La más intensa se observa en: las células intersticiales de Cajal, memb apical epitelio vesícula seminal, células serosas glánd salivares. 

         *Tinción débil o moderada: células mucinosas gl.salival, céls epiteliales de estómago, vesícula, células caliciformes intestinales, trompa, c. mioepiteliales mama

         *Con el anticuerpo monoclonal SP31 hay reactividad cruzada y tinción intensa en los espermatocitos (puede ser de utilidad en biopsias de testículo por infertilidad).

- Utilidad principal: diagnóstico de GIST. Es el marcador más específico de GIST y se expresa en el 65-100 % de los casos. Tiene además mayor sensibilidad que c-kit: tiñe 1/3 de los GISts c-kit negativos. También se utiliza para el diagnóstico del carcinoma de células acinares de gl. salival (no totalmente específico).

- Otros tumores con positividad frecuente (>30% de los casos) para DOG1:  adenomas de células basales de gl.salival,  adenocarcinoma ductal páncreas, carcinoma escamoso esófago, adenocarcinoma esófago, ampulomas, carcinomas escamosos de cavidad oral y de vulva, adenomas y adenocarcinomas colorrectales, carcinomas endometrioides de endomterio.

- Por tanto el valor de DOG1 como marcador diagnóstico de GIST es mayor en tumores fusocelulares que en los epitelioides (como hemos visto hay muchos carcinomas positivos para DOG1), aunque hay que recordar que los leiomiosarcomas también pueden presentar con cierta frecuencia positividad (27%).

- El valor pronóstico de la sobreexpresión de DOG1 es controvertido.

Referencias:

Miettinen 2009. AJSP

Jansen 2021. Pathol Res Pract.

Salama 2019. Ann Diag Pathol

Rekhtman 2020. Quick Refererence Handbook

ARID1A

- Tinción normal: Positividad nuclear.

- Tinción patológica: núcleos negativos: la ausencia de expresión sugiere mutación del gen.

- En numerosas neoplasias puede haber pérdida de ARID1A (mutación de ARID1A). Las diferencias en la frecuencia de estas mutaciones puede ayudar al diagnóstico (por ejemplo, carcinoma seroso de endometrio vs carcinoma endometrioide de alto grado; carcinoma de células claras de ovario vs carcinoma no células claras; etc).

BRAF

- Nos referimos al anticuerpo VE1 para la mutación V600E en BRAF:

- El gen BRAF se localiza en el brazo largo del cromosoma 7. Las mutaciones en BRAF se observan en diferentes neoplasias, y de ellas, la más frecuente es la V600E. La mutación V600E consiste en la sustitución de valina por ácido glutámico en el resíduo 600. 

- La mutación V600E se observa en un 55% de melanomas (diana terapéutica), 40-50% de carcinomas papilares de tiroides (diana terapéutica y utilidad para diagnóstico diferencial benignidad-malignidad), 30% de cáncer de ovario, 5% de carcinomas colorrectales sin inestabilidad de microsatélites, algunos carcinomas colorrectales con pérdida de expresión IHQ de MLH1 (en los que sugiere que esta última ocurre por metilación de su promotor y no por mutación en línea germinal de MLH1:es decir, la mutación en BRAF excluiría un síndrome de Lynch), 3% de carcinoma pulmonar no microcítico (diana terapéutica), leucemia de células peludas.

- La proteína resultante de la mutación V600E es detectable mediante IHQ con el anticuerpo monoclonal VE1. Por ello la positividad IHQ puede servir como screening para indicar estudio molecular (que se requiere, para confirmar la mutación).

- Por tanto: en una célula normal la tinción debe ser negativa; en una célula con mutación V600E será positiva.

- Patrón de tinción: citoplasmática.

Referencias:

Rekhtman 2019.

Dvorak 2019. Pathol Oncol Res

Seto 2019. Pathol Internat

Rashid 2020. J Clin Lab Anal

Fumarato hidratasa

- La fumarato hidratasa o fumarasa es un enzima del ciclo de Krebs.

- Patrón de tinción IHQ: citoplasmático.

- Patrón normal: positividad  La expresión se pierde en neoplasias “deficientes” en fumarato hidratasa:

- Carcinoma de células renales deficiente en FH: muy raro esporádico; generalmente en el contexto de un síndrome HLRCC (carcinoma de células renales y leiomiomatosis hereditarios), autosómico dominante, por mutación en la línea germinal.Histología peculiar.

- Leiomiomas uterinos deficientes en FH: igualmente, por mutación somática o germinal (síndrome HLRCC). Histología peculiar.

- Leiomiomas cutáneos (si son múltiples y ampliamente distribuidos suelen ser la principal manifestación del síndrome HLRCC). Histología convencional.

- Además de la pérdida de FH, todos estos tumores son positivos para el marcador 2-SC, útil para el diagnóstico.

- Si se diagnostica alguna de estas lesiones recomendad estudio en línea germinal para descartar mutación de FH / síndrome HLRCC.

-Se han  descrito algunos casos de otros tumores con ocasional disminución de FH como algunos paragangliomas, t, de c, de Leydig,etc

H3K27m

- Detecta proteína resultante de mutaciones en la posición 27 de la histona H3. 

              **OJO: es anticuerpo diferente al H3K27me3.

- Utilidad: diagnóstico de los gliomas de la línea media.

IDH1

- Patrón de tinción: citoplasma.

 - Este anticuerpo es específico para la proteína resultante de la mutación en el codón 132 de IDH1, que es la mutación más frecuente): la proteína IDH1R132H ; se utiliza para detectar los gliomas mutados para IDH (detecta el 90% de las mutaciones).

                 * En el 10% de mutaciones restantes, la tinción IHQ es negativa y se requiere estudio molecular para detectarlas. (Si realmente no hay mutaciones de IDH, es decir los gliomas “wild- type” son similares clínica y molecularmente a glioblastomas, aunque tengan histología de bajo grado).

Referencia: 

Rekhtman 2019

         

NTRK

- NTRK = Neurotrophic tropomyosin receptor kinase

- Biomarcador. La IHQ sirve como screening pero tendrá que confirmarse con técnicas de biología molecular (FISH o NGS).

- Existen 3 genes NTRK (1, 2 y 3), que codifican 3 proteínas Trk. Estas se expresan normalmente en sistema nervioso central y periférico y capa de músculo liso de los vasos.

- Las fusiones con los genes NTRK ocurren en algunas neoplasias, sobre todo con NTRK1 y NTRK2: son muy frecuentes en algunos tumores muy raros y muy infrecuentes en la mayoría de las neoplasias:

- La IHQ detecta el aumento anormal de la proteína TRK resultante de dicha fusión. Ventajas: rapidez, disponibilidad y precio. El anticuerpo utilizado detecta la región C-terminal de las 3 proteínas TRK, por lo que se detecta tanto las proteínas normales como las resultantes de la fusión, por ello este anticuerpo se denomina pan-TRK.

- Patrón de tinción: Variable y depende de la fusión concreta . Puede ser: nuclear, citoplasmático granular, citoplasmático difuso, de membrana, patrones combinados.

- Controles: la proteína normal ("wild type"), como hemos señalado antes, está expresada en sistema nervioso central y periférico (por ejemplo, corteza cerebelosa siendo la sustancia blanca casi negativa o débil, nervios periféricos, células ganglionares) y más débil en a muscular de los vasos.

- Umbral de tinción para determinar positividad: varía en la literatura entre 1 y 10%.

- Problema: la especificidad (50-80% según autores). Tumores sin fusión de Trk, con diferenciación neural o muscular, tumores neuroectodérmicos / gliales, varios sarcomas y otros, que tienen tinción intensa de la Trk normal (wild type).

Referencias:

- Weiss, Hum Pathol 2021.

- Penault-Llorca. J Clin Pathol 2019

Citoqueratina 19

- Patrón de tinción: citoplasmática.

- Utilidades principales: diferenciar hepatocarcinoma (CK19-) de adenocarcinomas metastásicos en el hígado (CK19+); diferenciar seminoma (CK19-) de otros tumores germinales como carcinoma embrionario (CK19+); diagnóstico de las displasias del epitelio escamoso.

- Tejidos normales que expresan CK19: Fundamentalmente epitelios glandulares y capa basal de los epitelios escamosos no queratinizados (la epidermis es negativa), pero también muchas otras células.

- Tumores que SUELEN expresar CK19: Adenocarcinomas en general (páncreas, colorrectal, de esófago y estómago,...; carcinoma de mama; carcinomas seroso y endometrioide del ovario; carcinoma urotelial; carcinomas epidermoides.

- Tumores que SUELEN SER NEGATIVOS para CK19: Hepatocarcinomas, seminomas, tumores mesenquimales, tumores hematopoyéticos.

- También se utiliza para ayudar en lel diagnóstico diferencial entre adenoma folicular y la variante folicular del carcinoma papilar de tiroides aunque la especificidad es limitada: son CK19+ el 91-100% de los carcinomas y 44-68% de los adenomas. La rentabilidad diagnóstica aumenta si se combina con HBME1.

- Los cambios en la expresión de CK19 (aumento o disminución, según el tipo de tumor) pueden estar en relación con el grado de diferenciación y tienen impacto pronóstico en algunas neoplasias (mama, tiroides, riñón).

- Puede ser útil para el diagnóstico de displasias del epitelio escamoso: la sobreexpresión de CK19 puede ser un evento temprano en la transformación neoplásica de los epitelios escamosos, por lo que puede ayudar a reconocer la displasia.

Referencias:

Menz; Human Path 2021.

Erickson. Adv Anat Pathol 2008

DDIT3

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Utilidad principal: Diagnóstico del LIPOSARCOMA MIXOIDE, diferenciándolo de otros sarcomas.

- DDIT3 es un factor de transcripción nuclear implicado en la regulación de la génesis del tejido adiposo.

- En más del 95% de los liposarcomas mixoides existen fusiones con el gen DDIT3, no habiéndose identificado en otras neoplasias por lo que se consideran patognomónicas del liposarcoma mixoide y estos reordenamientos se pueden detectar con FISH. Esto puede ser necesario para llegar al diagnóstico, sobre todo ante tumores de alto grado o si tienen morfología de células redondas. Desde hace poco tiempo se dispone del anticuerpo que tenemos en nuestro panel y que puede servir para el mismo fin.

- Tiene valor, sobre todo, si la tinción es fuerte y difusa (98-100% de especificidad), puesto que tinciones débiles o focales se pueden observar en otros sarcomas, aunque con poca frecuencia. La sensibilidad es también alta (96%).

- En esta tabla tenéis los resultados en diferentes sarcomas:

- Referencia

Baranov; Mod Pathol 2021.

PRAME

* PRAME =  PReferentially expressed Antigen in MElanoma

* Patrón de tinción: NUCLEAR.

* Expresión en tejidos normales: testículo, ovario, placenta, suprarrenales, endometrio.

* UTILIDAD: Para el diagnóstico de malignidad en tumores melanocíticos:

    - PRAME es POSITIVO en la mayoría de los MELANOMAS (primarios o metastásicos) y NEGATIVO en la mayoría de los NEVUS. 

            - En los trabajos de Lezcano et al. fueron POSITIVOS el 88,5% de los melanomas no fusocelulares cutáneos invasivos, y NEGATIVOS el 86,9% de nevus melanocíticos. Fueron negativos el 100% de las inclusiones de células névicas en ganglios (útil para diagnóstico diferencial con melanomas metastásicos, los cuales fueron positivos). También fueron negativos los nevus azules cutáneos comunes estudiados, pero se ha comunicado un caso de nevus de Spitz en un niño positivo para PRAME.

            - OJO: Puede haber tinción débil en células hematolinfoides y en melanocitos no tumorales de piel con daño actínico.

            - OJO: la positividad no es específica de histogénesis: puede haber expresión de PRAME en neoplasias no melanocíticas como sarcomas y carcinomas de diferentes orígenes: En el trabajo de Jungbluth et al observaron las siguientes positividades:

Melanoma (metast.): 37/40 (93%);

Colorectal Ca: 0/10; RCCs (clear cell): 1/15 (15%); NSCLCs: 12/30 (40%);

Hepatocellular Ca: 1/10; Serous ovarian Ca.: 11/20 (55%); Invasive

ductal breast Ca.: 7/15 (45%); Synovial sarcoma: 10/10; Myxoid

liposarcoma: 5/5; Mesothelioma: 0/10.

                                         

Referencias:

- Lezcano, AJSP2018

- Jungbluth, Mod Pathol2018

- Lezcano, AJSP2020

H3K27me3

* H3K27me3 = Histona 3 trimetilada en la lisina en la posición 27.

* OJO: este anticuerpo detecta una alteración epigenética, con silenciamiento del gen. Es un anticuerpo diferente a H3K27M, que se usa para detectar mutaciones en dicho gen.

* Patrón de tinción: NUCLEAR. 

* Lo NORMAL es que sea positivo (valorar como control interno del tejido la tinción de células normales, por ejemplo células endoteliales y linfocitos). 

* Lo PATOLÓGICO es que se pierda la expresión, es decir la tinción NEGATIVA. 

* Utilidad: para el diagnóstico de TUMORES MALIGNOS DE LA VAINA NERVIOSA. 

            - En estos tumores suele haber mutaciones en EED/SUZ12 las cuales llevan a inactivación de PRC2. Esta alteración origina la pérdida de H3K27me3, es decir, la tinción IHQ es negativa. 

             - Sensibilidad variable en distintas series: 36 - 65,5%. 

            - La pérdida de tinción puede ser completa o parcial: el porcentaje de células negativas es variable. 

            - La pérdida de tinción es más frecuente en los tumores de mayor grado y cuando hay antecedentes de radiación. 

             - La pérdida completa de tinción es un factor de mal pronóstico en estos tumores vs. pérdida parcial de tinción o expresión intacta.

             - Aunque la pérdida es bastante específica de tumor malingo de la vaina nerviosa, también se puede observar en otros sarcomas asociados con radiación y en melanomas, no siendo tan útil para estos diagnósticos diferenciales.  

 

Referencias: 

Otsuka 2018. Pathol Res Pract. 

Anderson 2021. Diagnostics.

INSM1

- INSM1= "Insulinoma-associated protein 1" 

- Es un factor de transcripción implicado en el desarrollo embrionario de tejidos neurales y neuroendocrinos.

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Utilidad: marcador NEUROENDOCRINO altamente sensible y altamente específico:

Es positivo por ejemplo en: tumores neuroendocrinos de cabeza y cuello incluyendo el neuroblastoma olfatorio; tumores de islotes pancreáticos; en pulmón: oat cell, carcinoma de célula grande y carcinoide típico y atípicos, y tumorlets; carcinoma de células de Merkel de la piel; carcinoma medular de tiroides (siendo negativo en otros tumores de tiroides y en los de paratiroides) e hiperplasia de células C; tumores neuroendocrinos del tracto gastrointestinal; tumores ginecológicos, de mama y próstata con difereniación neuroendocrina. En carcinomas neuroendocrinos de alto grado ginecológicos se ha observado una mayor especificidad de este marcador comparado con los tradicionales (cromogranina, sinaptofisina, CD56) (únicamente se ha encontrado también tinción en el neuroepitelio de teratomas inmaduros).

Aunque es un marcador altamente específico, se ha observado positividad en aislados casos de : tumores no neuroendocrinos de cabeza y cuello (2,2%); pulmòn focalmente en: adenocarcinomas (3,3-3,6%) y carcinoma epidermoide (4,2-7%); tumores genitourinarios no neuroendocrinos (2,6%), o algunos casos de tumores de células pequeñas redondas y azules (Ewing, linfomas, rabdomiosarcomas).

En cuanto a su sensibilidad relativa, comparado con los marcadores tradicionales, hay datos contradictorios y diferencias en la literatura según diversos factores (tipo de muestra: la tinción puede ser focal / tipo de tumor / anticuerpos utilizados) pero parece que, globalmente: con respecto a la cromogranina INSM1 tiene una sensibilidad similar o mayor; y en comparación con CD56 y sinaptofisina depende de que anticuerpos se usen para estos dos últimos marcadores.

Referencias:

Rekhtman 2019

Seok 2021 Int J Surg Pathol

Zou 2021 Am J Surg Pathol

NUT

- "NUT" = "NUclear protein in the Testis"). 

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Control positivo normal: túbulos seminíferos (espermatogonias y algunos espermatocitos). Células germinales en el ovario.

- Utilidad: La positividad inmunohistoquímica para NUT es muy sensible y específica para determinar la existencia de los reordenamientos de NUT características del CARCINOMA NUT (tumor muy agresivo con aspecto de carcinoma pobremente diferenciado con característica diferenciación escamosa abrupta, localizado sobre todo en el tracto nasosinusal/respiratorio y el timo, que afecta a jóvenes y requiere demostrar el reordenamiento (FISH o PCR) o la positividad inmunohistoquímica para NUT para ser diagnosticado). 

*También se puede observar positividad para NUT en algunos tumores de células germinales, aunque con tinción débil y patrón no moteado como el del carcinoma NUT).

Bibliografía:

Rekhtman 2019.

French 2007.

SS18-SSX

- Marcador NUCLEAR de SARCOMA SINOVIAL.

-  Anticuerpo frente a las proteínas quiméricas que se originan por los reordenamientos SS18-SSX1, SS18-SSX2 y SS18-SSXA, que ocurren debido a las translocaciones t(X;18)(p11;q11) que son características del SARCOMA SINOVIAL.

- El anticuerpo que tenemos (clon E9X9V) tiene una sensibilidad para sarcoma sinovial del 95% (son negativas las raras variantes con otras fusiones) y alta especificidad (100% en la serie de Baranov et al. AJSP2020). Además en los casos postivos la tinción es intesnsa y difusa (>75%) de las células), ha funcionado con distintos métodos de desenmascaramiento y diferentes autoteñidores ensayados.

- En esta tabla se reúnen los casos probados para este anticuerpo en tres series diferentes:

Bibliografía:

JL Hornick. AJSP2021

R Perret. AJSP2020

E Baranov. AJSP2020

M Zaborowski Histopathol 2020

ATRX.

 - Significado: Alpha-thalassemia/mental retardation syndrome X linked.

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- La positividad es el patrón normal . En gliomas con mutación de ATRX hay PÉRDIDA de expresión (<10% de células tumorales +).     

                       * Debe haber positividad en el control interno (neuronas o endotelio vascular).

       

- Utilidad: Subclasificación de los gliomas, en conjunto con p53 y la codeleción 1p/19q:

                * ASTROCITOMA: ATRX-,p53+,NO codeleción 1p/19q

                * OLIGODENDROGLIOMA: ATRX+, p53-, SÍ codeleción 1p/19q

Referencia: Rekhtman 2019

Braquiuro.

 - Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Es un factor de transcripción implicado en el desarrollo de la notocorda. Se expresa en algunas espermatogonias.

- Utilidad: es POSITIVO en cordomas y hemangioblastomas.

MDM2

- Patrón de tinción: NUCLEAR.

- Oncoproteína, con poca expresión en células normales. Se sobreexpresa en liposarcomas.

- Utilidad: diagnóstico diferencial liposarcoma bien diferenciado (+) vs lipoma (-); o liposarcoma desdiferenciado (+) vs sarcomas pobremente diferenciados (-); o osteosacoma de bajo grado (+) vs lesiones fibróseas benignas (-).

* OJO: Los angiomiolipomas ricos en grasa pueden ser MDMS+.

Bibliografía:

Rekhtman, Baine, Bishop 2019.

Miogenina. Mio D1.

 - Son factores de transcripción, por tanto la tinción es NUCLEAR.

- Específicos de MÚSCULO ESTRIADO, siendo negativo el músculo liso (rabdomiosarcoma + / leiomiosarcoma -).

- En el rabdomiosarcoma, el patrón de tinción también da información: DIFUSO en el alveolar, FOCAL en el embrionario.

- En la rabdiomiogénesis MioD1 se expresa ANTES que miogenina. Por ello puede haber rabdomiosacromas embrionarios miogenina-/MioD1+.

- Aunque son positivos en el músculo en regeneración/diferenciación, en el músculo esquelético ya maduro (o en el rabdomioma) son negativos.